一、引言
紫外可見(jiàn)分光光度計,作為一種重要的分析儀器,被廣泛應用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域。它通過(guò)測量物質(zhì)對紫外可見(jiàn)光的吸收特性,實(shí)現對物質(zhì)的定性和定量分析。本文將詳細介紹紫外可見(jiàn)分光光度計的設計、原理與使用。
二、紫外可見(jiàn)分光光度計的設計
紫外可見(jiàn)分光光度計主要由光源、單色器、樣品池、檢測器和信號顯示系統五大部分組成。
1.光源:是提供符合要求的入射光的裝置,有熱輻射光源和氣體放電光源兩類(lèi)。熱輻射光源用于可見(jiàn)光區,一般為鎢燈和鹵鎢燈;氣體放電光源用于紫外光區,一般為氫燈和氘燈。
2.單色器:功能是將光源產(chǎn)生的復合光分解為單色光和分出所需的單色光束,它是分光光度計的心臟部分。
3.樣品池:用于容納樣品,使光能夠充分與樣品接觸。
4.檢測器:用于測量透射光的強度,將其轉換成電信號輸出。
5.信號顯示系統:將檢測器輸出的電信號轉換成可讀的吸光度或透射率值,并顯示在屏幕上。
三、紫外可見(jiàn)分光光度計的原理
紫外可見(jiàn)分光光度計的原理主要基于比爾-朗伯定律和蘭伯特-比爾定律。比爾-朗伯定律是指溶液中溶質(zhì)濃度與溶液對光的吸收成正比;蘭伯特-比爾定律是指光在透過(guò)介質(zhì)時(shí)強度與介質(zhì)厚度成指數關(guān)系。基于這兩個(gè)定律,紫外可見(jiàn)分光光度計利用光源發(fā)出一定波長(cháng)的光,樣品吸收部分光線(xiàn),其余光線(xiàn)通過(guò)樣品,最后通過(guò)檢測器測量透射光的強度,從而得到樣品對特定波長(cháng)光的吸收情況。
四、紫外可見(jiàn)分光光度計的使用
1.開(kāi)機:打開(kāi)樣品室蓋,檢查樣品室中是否放置遮光物,若有取出。打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),儀器進(jìn)入預熱狀態(tài),預熱20分鐘。
2.選擇光源:電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)后,鎢燈即亮;若需要在紫外光區工作,則需將光源切換至氘燈;若需要在紫外光區(290nm~360nm)工作,則要同時(shí)點(diǎn)亮氘燈和鎢燈。
3.選擇波長(cháng):調節波長(cháng)旋鈕或輸入實(shí)驗所需的波長(cháng),選擇須用的單色光波長(cháng)。
4.校準:目前型號較新的分光光度計具有開(kāi)機自動(dòng)校準功能,無(wú)自動(dòng)校準功能的設備使用前需參照使用說(shuō)明書(shū)手動(dòng)校準。
5.測量:如試驗方法中無(wú)特別規定,通常使用裝有蒸餾水的吸收池調零后放入樣品和參比樣進(jìn)行測試,并記錄測試結果。
6.數據處理:定量測試時(shí)通常需要先測定若干個(gè)已知濃度的待測物標準樣品,根據其吸光值與濃度繪制標準曲線(xiàn)。目前新型號的紫外分光光度計本身都有制作和計算標準曲線(xiàn)的功能,具體操作方式可參照設備使用說(shuō)明。不具備標準曲線(xiàn)繪制功能的設備,可利用Excel軟件或坐標紙輔助繪制。
7.關(guān)機:測量完畢,取出吸收池,清洗并晾干后入盒保存。關(guān)閉電源,拔下電源插頭,在樣品室內放入干燥劑,蓋上樣品室蓋,罩上防塵罩。
五、總結
紫外可見(jiàn)分光光度計以其靈敏度高、分辨率高、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),在化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域得到了廣泛的應用。通過(guò)了解其設計、原理與使用,我們可以更好地掌握這一分析儀器,為科學(xué)研究提供有力支持。